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浅析实验室高效液相色谱仪使用的注意事项!

返回列表 来源:未知 发布日期:2021-06-22 16:26【

北京中惠普分析技术研究所浅析实验室高效液相色谱仪使用的注意事项
1注重使用的环境
在高效液相色谱仪检测过程中,为了有效避免光线直射,给检测造成的影响,显示装置应侧向光线,同时实验室内需加挂窗帘,以便快速地调节室内的光照强度。在液相色谱仪使用过程中应保持良好的通风,排岀室内的有害气体,保证空气清新,通常可使用强制通风和自然通风两种方式,自然通风主要是利用内外气压和门窗开展通风作业,强制通风则是利用排风扇和排风柜完成通风。此外,良好的室内环境和适宜的温度可为高效液相色谱仪的工作提供支撑,有利于高效液相色谱仪稳定性能,保持正常运行,通常情况下高效液相色谱仪适宜的工作温度为20 ~ 30t,温度变化幅度最好应控制在2~3t以内,避免出现温度的剧烈波动。尤其应注意的是在夏季和冬季,应做好保温工作。高效液相色谱仪在使用过程中,环境相对湿度应控制在60%以内。
2色谱柱的保护柱和柱效
在更换高效液相色谱仪色谱柱之前,应仔细阅读色谱柱的使用说明和注意事项,并开展柱效的相应测试工作。另一方面,为保证高效液相色谱仪的测试精度,应定期对柱效进行检测,并保存更换的新色谱柱的色谱图,注明新色谱柱使
用注意事项和使用条件。工作人员应定期检测色谱带。针对对外提供在线检测服务的高效液相色谱仪,应对检测设备提供足够的物理保护和化学保护,通常采用安装在线过滤器和保护柱的方式。高效液相色谱仪柱体的保住主要是通过
保护柱完成的,在避免化学污染方面作用显著,但是也存在明显的不足,突岀表现在保护柱在起作用的过程中,会影响柱效,该问题在微柱使用时更为突岀,普通的自动填料保护柱常会产生较大的检测偏差。
3紫外检测器使用注意事项
紫外检测器的使用寿命与使用次数相关,为有效延长紫外检测器的使用时间,平时应尽可能降低氖灯的使用次数,在柱平衡进行50%以上后,打开检测光源,也可在流通池中溶液连续流动5 ~7分钟后,打开光源。同时应在检测分析完成之后立刻关闭检测光源。在日常管理和清洁工作中,应做好地面的洗尘工作和检测器周围环境的清洁工作,防止检测器因吸附大量的灰尘导致性能下降。如果发现检测器由于内部气泡的出现而产生了检测干扰,则应进行相应的定量分析,同时确保流动相脱气充分。现阶段的高效液相色谱仪通常带有自动检测气泡的功能,如发现流动相中含有气泡,会进行自检和校正,并发岀提醒。
4样品处理
需测定的样品应在流动相中容易溶解,难以溶解的样品,可能会在检测过程中结晶析岀,导致测量不准确或者造成色谱柱的堵塞。除此之外,应注意样品中避免强酸、强碱和盐类物质的存在,可使用预处理柱除去其中的极性较强物
质和不可逆吸附杂质。
5做好使用后的清洁工作
高效液相色谱仪在使用之后应进行相应的清洁工作,具体包括以下几方面:
(1)色谱柱的清洗。在使用高效液相色谱仪之前,应对需检测的样品进行充分的了解,并使用针对该样品洗脱能力较强的流动相来完成清洗工作。每一种特定的色谱柱,对应的清洗方法略有不同,应在清洗之前认真阅读清洗说明。如使用硅胶柱进行检测和分析,则应先使用甲醇清洗附着在柱体上的极性杂质,在此基础上使用正庚烷和二氯甲烷进行活化,最后应使用甲醇、氯仿、甲醇、水依次完成最终的清洗。
(2)重视密封圈的清洗工作。高效液相色谱仪使用之后,应对输液泵密封圈进行清洗,密封圈处是非挥发性缓冲剂残留较多的地方。在设备关机之后,残留在此处的溶剂仍有继续挥发的可能,并在泵体内表面形成沉积物和附着物,导致密封圈处的磨损,影响后续的使用。通常情况下,对于泵密封圈处的清洗,可在泵体后端的清洗口注入纯水,直至液体清澈,无固相产生,则清洗工作完成。